叫床三级做爰高清视频在线,小黄片无码在线观看视频,亚洲av日韩av不卡精品,大鸡鸡顶我视频在线播放

產(chǎn)品列表PRODUCTS LIST

首頁 > 技術(shù)與支持 > 引物的合成及純化方式
引物的合成及純化方式
點擊次數(shù):1867 更新時間:2022-10-24

  目前引物合成基本采用固相亞磷酰胺y三酯法。該方法具有高效、快速的偶聯(lián)以及起始反應(yīng)物比較穩(wěn)定的特點。主要是將DNA固定在固相載體上完成DNA鏈的合成,由待合成引物的3'端向5'端合成延伸,相鄰的核苷酸通過3'→5'磷酸二酯鍵連接。

固相亞磷酰胺三酯法合成引物的具體步驟如下:

1) 用三lv乙酸去除固相載體5'-羥基的保護基團DMT,獲得游離的5'-羥基;

2) 將亞磷酰胺保護核苷酸單體與活化劑四氮唑混合,得到核苷亞磷酸活化中間體,與游離的5'-羥基發(fā)生縮合反應(yīng);

3) 由于無法*的5'-羥基都參與縮合,可能有極少數(shù)5'-羥基沒有參加反應(yīng)(少于2%),可用乙酸酐和1-甲基咪唑試劑將其終止合成,這種短片段可以在純化時分離掉;

4) 在氧化劑的作用下,亞磷酰形式轉(zhuǎn)變?yōu)楦€(wěn)定的磷酸三酯,使DNA磷酸骨架更穩(wěn)定。

經(jīng)過以上四個步驟,一個脫氧核苷酸就被連接到固相載體上。重復(fù)以上步驟,直到所有要求合成的堿基連接完成。合成過程中可以監(jiān)控脫下的保護基團DMT的顏色可以初步判定合成效率。

引物純化方式選擇:

1、C18柱脫鹽:

有人稱其為簡易反相柱,它對DNA有特異性的吸附,可以被有機溶解洗脫,但不會被水洗脫,所以能有效地去除鹽分。它不能有效去除比目的片段短的小片段。實際上,它是一種脫鹽的作用。這種方法一般不會對普通PCR反應(yīng)產(chǎn)生影響。對于需要用于測序、克隆的引物不能使用這個級別。
2、OPC純化: 

OPC純化是根據(jù)DNA保護基(DMTr基)和Cartridge柱中樹脂間的親合力作用的原理進行純化目的DNA片段。OPC法純化的DNA純度大于95%。適用于40mer以下引物的純化。
3、PAGE純:

PAGE純化法是使用變性聚丙烯酰胺凝膠電泳,對DNA片段進行分離,然后從凝膠中回收目的DNA的方法。PAGE純化法也是一種非常有效的DNA純化方法,純化后的DNA純度大于95%,對長鏈Oligo DNA (大于50mer)的純化特別有效。
4、HPLC純化:

HPLC純化是使用高效液相色譜的原理,對DNA片段進行純化。純度可以大于99%。主要用于短鏈和修飾引物的純化。該法的弱點是成本較高,批量效率不高。

爱啪欧美啪精品一区二区| 国产桃色精品无码费视频| 久久综合日韩精品色亚洲| 午夜不卡久久精品无码免费| 天天躁夜夜躁狠狠躁2021| 手机在线观看免费AV片| 亚洲国产成人精品无码区花野真一| 波多野结衣超清无码教师| 99re小视频在线观看| 国内少妇偷人精品视频免费 | 啊啊啊嗯嗯不要视频在线| 精品久久久久精品三级18| 精品久久久久久无码中文野结衣 | 欧美多人玩3p视频一区| 91超碰青青频精品国产| av熟女人妻一区二区三区| 亚洲综合高清一区二区三区| 日本精品伦一区二区三区| 国产自产精品自在线观看| 亚洲中文字字幕AV影院| 人妻聚色窝窝人体www一区| 亚洲黄色资源网在线观看| 亚洲午夜伦理大片一区二区| 福利姬国产精品一区在线| 激情第一区仑乱| 久久久噜噜噜噜噜噜噜色| 极品尤物福利视频在线观看| 久久中文久久一区二区三区| 久久久久久精品免费亚瑟| 久久久久久久久久不能色| 欧美人妻精品一区二区三区| 欧美亚洲日本精品一区二区| 国产精品成人精品久久久| 丰满人妻熟妇乱又伦精品| 成年女人午夜毛片免费视频| 亚洲男生和女生操逼网站| 国内精品久久久久影院日本| 天堂在线资源www中文| 思思久久精品在热线热| 熟妇人妻中文av无码| 亚洲欧美波霸爆乳a片3|