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導致基因探針法PCR試劑盒變質(zhì)的原因及使用注意事項
點擊次數(shù):1124 更新時間:2021-01-20
  基因探針法PCR試劑盒變質(zhì)了就沒辦法使用了,因為它會影響實驗結(jié)論。那具體是哪些原因會導致它變質(zhì)呢?下面請聽聽的講述。
  1、試劑因素
  不同批次的產(chǎn)品在制作過程中很難保證質(zhì)量*一致,即使是通過批檢的項目其檢測結(jié)果也存在差異,因此必須選擇和訂購長批號的試劑,并保證保存條件。嚴格執(zhí)行這一標準可以避免因試劑批號改變而重新建立質(zhì)控體系及重新評估試劑的復雜過程,并且能夠保證結(jié)果的穩(wěn)定性;對于效期短、使用率低的試劑,應(yīng)當小量分裝,每次使用則取分裝部分即可,避免反復凍融造成試劑的失效。
  2、樣本因素
  標本干擾因素包括內(nèi)源性干擾因素和外源性干擾因素,前者包括類風濕因子、補體、異嗜性抗體、自身抗體、溶菌酶等,后者包括標本溶血、標本被污染、標本貯存時間過長、標本凝固不全、冷凍標本的反復凍融等。
  3、操作因素
  操作步驟復雜,操作不當將引起較大的誤差。加樣、溫育、洗滌、顯色、比色。
  在使用基因探針法PCR試劑盒的過程中應(yīng)注意些什么呢?
  1、PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行,設(shè)立一個的PCR實驗室。
  2、純化模板所選用的方法對污染的風險有很影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
  3、所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
  4、PCR試劑配制應(yīng)使用高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
  5、PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。
  6、試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
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