叫床三级做爰高清视频在线,小黄片无码在线观看视频,亚洲av日韩av不卡精品,大鸡鸡顶我视频在线播放

產(chǎn)品列表PRODUCTS LIST

首頁(yè) > 技術(shù)與支持 > 大鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基運(yùn)輸和保存
大鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基運(yùn)輸和保存
點(diǎn)擊次數(shù):2294 更新時(shí)間:2018-11-12

大鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基運(yùn)輸和保存:
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶(hù)協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無(wú)法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿*培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),如鋪瓶率超過(guò)85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過(guò)夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動(dòng),使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開(kāi),吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶?jī)?nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長(zhǎng)至60%~70%融合時(shí),用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長(zhǎng)情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個(gè)25cm2培養(yǎng)瓶中,每?jī)尚r(shí)隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長(zhǎng)曲線 取指數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線

国产精品一区二区三区区别| 午夜好爽好舒服免费视频| 99热这里只有精品| 亚洲av成人久久精品小说| 久久 国产精品 二区三区| 仓井空一区二区免费视频| 亚洲色精品一区二区三区| 午夜福利中文字幕在线看| 久久无码中文字幕久久无| 男人的天堂亚洲高清av| 一区二区三区综合色婷婷| 成人精品色一区二区三区| 欧美精品久久久天堂一区| 国产亚洲女人久久久久久| 无码中文av有码中文a| 国产熟女一区二区三区五月婷| 精品美女aⅴ国产女教师| 撒玛利亚女孩免费在线观看| 人妻少妇精品性色av免费| 中文字幕第一页在线播放| 黑森林av福利精品导航| av男人的天堂在线免费| 国产精品鲁鲁鲁| 久久热这里只有精品国产| 一本久道久久丁香狠狠躁| 国产精品久久久久亚洲av| 久久中文久久一区二区三区 | 少妇人妻偷精品免费视频| 日韩欧美一区二区在线插播| 国产乱人伦一区二区精品| 99视频有精品视频15| 国产又色又爽又黄刺激在线观看| 国产精品毛片久久久久久l| 天天好逼网,好逼天天有| 国产普通话对白一区二区 | 国产网红无码精品福利网| 亚洲二区无码AV在线精品| 29uuu人妻欧美一区| 欲香欲色天天天综合和网| 日韩精品无码人成视频手机| 一本色道久久加勒比综合|